高速逆流色譜簡稱HSCCC，是***種液-液色譜分離技術，它的固定相和流動相都是液體，沒有不可逆吸附，具有樣品無損失、無污染、高效、快速和大制備量分離等優(yōu)點，已經(jīng)廣泛應用于生物醫(yī)藥、天然產(chǎn)物、食品和化妝品等領域，特別在天然產(chǎn)物行業(yè)中已被認為是***種有效的新型分離技術，適合于中小分子類物質(zhì)的分離純化。

高速逆流色譜儀利用液液兩相的逆流分配，在沒有固體填料、不需使用固態(tài)固定相的情況下，而是利用離心力產(chǎn)生的恒定力將固定相保留在由管道連接的***系列的腔體中，實現(xiàn)復雜化學物質(zhì)的混合物分離。它以液體溶劑為固定相，螺旋柱在行星運動時產(chǎn)生的離心力，使互不相溶的兩相不斷互相混合，同時保留其中的***相，使用恒流泵連續(xù)輸入另***相，樣品溶質(zhì)在兩相之間反復分配，按分配系數(shù)的次序，被依次洗脫出來，它替代了傳統(tǒng)制備型高效液相色譜的填充柱。

那在選購***臺高速逆流色譜儀的時候，哪些指標是衡量其性能的關鍵指標呢？

（***）固定相保留率

由于高速逆流色譜儀的固定相是液體，在分離過程中如何將液體固定相***直保留在里面，是所有生產(chǎn)廠***和使用者***關心的問題，它是由儀器的本身性能決定的，它與公轉(zhuǎn)半徑、自轉(zhuǎn)半徑、旋轉(zhuǎn)速度等因素有關，也與流動相的流速有關聯(lián)，與溶劑體系關系不大；***好設備的固定相保留率可以達到90%；***般設備的固定相保留率為50%。

如果設備的固定相保留率較低，則對兩相溶劑體系的選擇和配比要求就高，使用者就需要不斷調(diào)整溶劑配比，進行多次實驗摸索，找到***佳的配方，以提高樣品的分離度，才能將樣品中的多個成分分離出來；如果設備的固定相保留率很高，對兩相溶劑體系的選擇和配比要求就十分寬松，稍微調(diào)整就能將樣品中的多個成分分離出來，更為重要的是有些樣品只有在高的固定相保留率下才能分開，固定相保留率低就無能為力了。

（二）線圈的數(shù)量和柱體積

近幾年動態(tài)平衡技術大幅提高，***先實現(xiàn)了每個線圈可以獨立繞制就能平衡，其次完成了多個線圈混合繞制，***終實現(xiàn)了***臺儀器上可以放置多個線圈的夢想，經(jīng)常配置兩個線圈或四個線圈。

柱體積是由線圈的直徑和長度決定的，其大小影響到上樣量的多少，合理的配置柱體積可以覆蓋大部分樣品的制備。如果條件允許，配置4個不同柱體積的線圈，使用起來將更方便，能實現(xiàn)線圈之間的串并聯(lián)，從而提高樣品的分離效果和分離能力。

（三）線圈的材質(zhì)

高速逆流色譜儀的線圈材質(zhì)***般使用PTFE材料，它耐酸耐堿，同時適合所有的有機溶劑，材質(zhì)價格也便宜，重量較輕，很容易實現(xiàn)動態(tài)平衡，但唯***缺點是耐壓較低，在高速旋轉(zhuǎn)的情況下，工作壓力超過10bar或者線圈出口堵塞，PTFE線圈就有可能爆裂，產(chǎn)生溶劑泄漏；***旦發(fā)生內(nèi)部線圈爆裂，對設備將是毀滅性的，修復的成本是十分昂貴的；采用316不銹鋼制作線圈，是近幾年動態(tài)平衡技術大幅提高以后才出現(xiàn)的，徹底解決了高速逆流色譜儀耐壓低的缺陷，工作壓力可以承受1000bar，由于316不銹鋼材質(zhì)較重，成本高，線圈繞制難度大，動態(tài)平衡技術要求高，從而導致儀器整體價格偏高；鈦合金是近幾年出現(xiàn)的***種新型材料，它克服了316不銹鋼材質(zhì)較重的缺點，對動態(tài)平衡技術要求不高，但鈦合金材質(zhì)的價格比316不銹鋼要貴出很多，是三種材質(zhì)中的儀器價格***貴的。

除此之外，設備的各個安全保護功能，進樣六通閥，以及不同體積的樣品定量環(huán)是高速逆流色譜儀必須配置的，以便于今后的安全保障和使用方便。

高速逆流色譜在天然產(chǎn)物有效成分的分離純化領域中有著獨特的優(yōu)勢，還可以實現(xiàn)多種形式的梯度洗脫過程，既可用于天然植物粗提物的去除雜質(zhì)，也可用于***后產(chǎn)物的精制，甚至直接從未經(jīng)處理的粗提物***步純化得到純品。隨著越來越多的研究者的加入，高速逆流色譜將得到更加廣泛的應用和發(fā)展。